一、概述
磷酸盐缓冲液是一种能够抵抗外来少量强酸或强碱的干扰,保持其pH值相对稳定的溶液。这篇文章小编将以20mmol/L的磷酸盐缓冲液为例,介绍怎样配制不同pH值的磷酸盐缓冲液。
二、所需试剂及工具
1. 磷酸氢二钠(Na2HPO4)
2. 磷酸二氢钠(NaH2PO4)
3. 盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)(用于调节pH值)
4. 去离子水
5. 称重纸
6. 容量瓶
7. pH试纸或pH计
三、配制步骤
以配制pH值为7.4的20mmol/L磷酸盐缓冲液为例:
1. 根据需要配制的缓冲液体积,按照一定比例称取Na2HPO4和NaH2PO4。具体比例可通过查阅相关文献资料或在线计算工具获得。
2. 将称取的试剂加入去离子水中,加热搅拌,使其充分溶解。
3. 使用pH试纸或pH计测定溶液的pH值。如需要调整pH值,可加入适量盐酸或氢氧化钠。
4. 不断搅拌,直至达到所需的pH值。
5. 将溶液定容至所需体积,摇匀。
6. 高温高压灭菌,保存于室温或4℃冰箱中。
四、注意事项
1. 试剂的纯度会影响缓冲液的配制效果,因此应使用分析纯以上的试剂。
2. 配制经过中要保持溶液的温度稳定,避免局部过热导致试剂失效。
3. 在调节pH值时,要注意逐滴加入酸或碱,并随时监测溶液的pH值变化。
4. 配制好的缓冲液需进行灭菌处理,以防止微生物生长影响缓冲液质量。
5. 缓冲液应保存在密封容器中,避免长时刻暴露在空气中。
五、不同pH值磷酸盐缓冲液的配制技巧类似,只需调整Na2HPO4和NaH2PO4的比例以及调节pH值时加入的酸或碱的量即可。在实际操作经过中,可根据具体需求进行适当调整。
